Partitioning of cellulolytic activity in the polyethylene glycol/dextran two-phase systems

Abstract

This study is concerned with the partitioning of cellulolytic activity in the polyethylene glycol/dextran two-phase systems. In the system of 10% (w/w) polyethylene glycol 1500/5% (w/w) dextran 500,000/80% (w/w) crude enzyme at the pH 5, 100%, yield of cellulolytic activity from Penicillium sp. in the top phase was achieved in a single extraction step. Addition of KH2PO4 to this system at a concentration of 15 mmol/L improved the purification factor in the top phase for cellulolytic activity from crude preparation to a value of 2.6, although it had an adverse effect on the yield in the same phase.

U radu je ispitana raspodela celulolitičke aktivnosti u vodenim dvofaznim sistemima polietilenglikol/dekstran. Maksimalno moguć 100% prinos celulolitičke aktivnosti dobijene kultivacijom Penicillium sp. postignut je u dvofaznom sistemu sastava 10% (m/m) polietilenglikol 1500/5% (m/m) dekstran 500000/ 80% (m/m) sirovi enzim na pH 5 u samo jednom koraku ekstrakcije. Dodatak KH2PO4 u koncentraciji 15 mmol/l u ovaj sistem, iako je smanjio raspodelu celulolitičke aktivnosti iz sirovog enzimskog preparata u gornju fazu sistema, poboljšao je faktor prečišćavanja u toj fazi na vrednost 2,6. Razlike u odzivu između celulolitičkih aktivnosti iz dva ispitivana izvora na promene faktora koji utiču na raspodelu mogu se objasniti različitom kompleksošću njihovih matriksa - komercijalnog, delimično prečišćenog, i sirovog neprečišćenog preparata dobijenog kultivacijom. Naime, i prisustvo samih kontaminenata može dodatno uticati na raspodelu enzimske aktivnosti.